La diferenciación precisa entre hematíes (eritrocitos) y levaduras en muestras de orina es crucial para un diagnóstico clínico correcto, ya que su presencia puede indicar condiciones de salud muy diferentes. Los eritrocitos en la orina (hematuria) suelen asociarse con daño glomerular o lesiones vasculares del sistema genitourinario, mientras que las levaduras, al ser hongos microscópicos, pueden señalar una infección fúngica.
Aunque ambos pueden tener formas que llevan a confusión bajo el microscopio, especialmente los eritrocitos retraídos, existen características morfológicas distintivas y protocolos de observación que permiten una identificación adecuada.
Morfología de los Eritrocitos y su Significado Clínico
Los eritrocitos o hematíes tienen forma de discos bicóncavos de alrededor de 7 μm de diámetro, de aspecto liso y anucleados. En una preparación sin teñir, los eritrocitos son pequeños y redondos, presentan una ligera coloración anaranjada y una apariencia suave.
La concentración de la orina afecta a la morfología de los eritrocitos. Si la orina está concentrada (hiperestenuria), los eritrocitos pierden agua y se retraen, apareciendo con forma irregular estrellada. Si están muy retraídos, pueden confundirse con levaduras.
La significación clínica de la aparición de eritrocitos en orina (hematuria) está asociada con daño de la membrana glomerular o lesiones vasculares del aparato genitourinario. Se puede discriminar la localización de la lesión a partir de la morfología que presenten en orina:
- La presencia de hematíes isomórficos tiende a señalar patología urológica.
- Los hematíes dismórficos suelen indicar lesión de tipo glomerular.
Igualmente, la hematuria se llama macroscópica cuando la orina tiene color rojo o marrón, y frecuentemente se asocia a daños de la vía urinaria (traumatismos, infección…).
La orina normal debe contener menos de 5 eritrocitos por campo con aumento de ×400. El aumento de eritrocitos en la orina (hematuria) indica hemorragia en algún lugar del sistema urogenital; no obstante, la recolección de muestras mediante cistocentesis o cateterismo puede inducir hemorragia.
ERITROCITOS EN EL SEDIMENTO URINARIO - Glóbulos rojos isomórficos y dismórficos en orina
Morfología de las Levaduras y su Observación
A diferencia de los mohos, las levaduras son organismos unicelulares, de forma redondeada o ligeramente ovalada. Los mohos y las levaduras son dos tipos de hongos microscópicos de gran importancia en el ámbito sanitario, al ser causantes de diversas micosis y micotoxicosis.
Práctica de laboratorio para la observación de levaduras al microscopio óptico
Para la realización de esta práctica, se necesita una muestra de levaduras activas (a fin de poder observarlas en proceso de gemación). Lo más sencillo es disolver un sobre de levadura de panadería en un vaso de agua con un poco de azúcar.
Materiales para la observación de levaduras:
- Papel de filtro por cada puesto de trabajo
- Portaobjetos
- Cubreobjetos
- Pipeta Pasteur
- Asa de siembra
- Colorantes para tinción (opcional)
- Frasco lavador
- Agua destilada
- Mechero de alcohol
- Muestra de levaduras
Protocolo para la observación en fresco de levaduras:
- Tomar una gota de la muestra de levaduras con una pipeta Pasteur.
- Depositarla sobre el portaobjetos.
- Colocar un cubreobjetos encima.
- Observar al microscopio con aumentos x4, x10, x40.
Si bien las levaduras pueden resultar "menos interesantes", algo que merece la pena observar es su peculiar forma de reproducirse: la gemación. Si se activa la muestra de levaduras, se verá que a muchas de ellas comienza a salirle una pequeña célula hija en un lado, otras en las cuales esta gema está a punto de despegarse o incluso otras que ya han terminado de hacerlo y se encuentran al lado de su “célula madre” (reconocibles porque la célula madre es de mayor tamaño que la hija).
Tinción de las muestras (opcional)
Este paso es opcional, ya que ambos tipos de microorganismos se ven bastante bien sin la necesidad de teñir. Si se desea teñir, el procedimiento a seguir es el siguiente:
- Una vez que se extiende la gota sobre el portaobjetos, se deja secar.
- Se fija con calor (pasar el portaobjetos por la llama del mechero tres veces).
- Se añade un colorante (por ejemplo, azul de metileno o safranina) a la muestra.
- Se deja actuar unos 5 minutos.
- Se enjuaga, se seca y se observa al microscopio. En este caso no se utilizará cubreobjetos.
Análisis de Orina: Un Vistazo General
El análisis de orina es una prueba importante de laboratorio que es útil para documentar varios tipos de enfermedades del tracto urinario y puede proporcionar información sobre otros procesos sistémicos. La orina se puede colectar mediante cistocentesis, cateterismo uretral o micción espontánea.
La orina debe evaluarse durante los 30 minutos posteriores a la recogida, aunque si no fuese posible, podría refrigerarse y analizarse durante un periodo de 24 horas o bien enviarse a un laboratorio externo. Este retraso en la realización del análisis puede provocar la precipitación de cristales. La refrigeración no altera el pH ni la densidad específica de la orina.
Examen Microscópico del Sedimento Urinario
El examen microscópico del sedimento urinario debe formar parte del análisis rutinario de la orina. Para la centrifugación, se transfieren 3-5 ml de orina a un tubo de centrífuga cónico. La orina se centrifuga a 1000-1500 rpm durante 3-5 minutos. El sobrenadante se decanta, dejando aproximadamente 0,5 ml de orina y el sedimento en la punta del tubo cónico. El sedimento se resuspende agitando la punta del tubo cónico varias veces.
Se transfieren unas gotas del sedimento a un portaobjetos de vidrio y se coloca un cubreobjetos. Se recomienda el examen de orina sin teñir para muestras de rutina. El examen microscópico se realiza con aumentos de ×100 para cristales, cilindros y células, y de ×400 para células y bacterias. El contraste de la muestra se mejora cerrando el diafragma y bajando el condensador del microscopio. Para la identificación celular se pueden emplear tinciones como Sedistain® y el nuevo azul de metileno, pero pueden diluir la muestra e introducir precipitados de colorante y cristales.
Diferencias Clave entre Eritrocitos y Levaduras en el Sedimento Urinario
La tabla siguiente resume las principales características para diferenciar hematíes de levaduras:
| Característica | Eritrocitos (Hematíes) | Levaduras |
|---|---|---|
| Forma | Discos bicóncavos, redondos, a veces estrellados (retraídos) | Redondeada o ligeramente ovalada |
| Tamaño | Alrededor de 7 μm de diámetro | Variable, similar o ligeramente menor que eritrocitos retraídos |
| Núcleo | Anucleados (sin núcleo) | Nucleados (poseen núcleo, aunque no siempre visible claramente) |
| Aspecto | Liso, ligera coloración anaranjada, suave | Pueden presentar gemación (brotes) |
| Movimiento Browniano | Pueden mostrarlo | Pueden mostrarlo |
| Reacción a Ácido Acético | Lisan (se destruyen) | No lisan (resisten) |
| Tinción | Sin teñir, coloración natural | Se tiñen bien con azul de metileno o safranina |
| Significado Clínico | Hematuria (daño glomerular, lesiones vasculares) | Infección fúngica (micosis) |
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